| 小C讲堂第36讲——“挑战性液体”如何进行准确移液 | |||
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目前常见的移液器大多数基于气体活塞原理，可适用于常规的移液操作。但当遇到高粘度、易挥发性、高密度及非室温状态下的液体，该移液器移液结果的精度和准确性可能会受到影响。针对这些具有挑战性的特殊液体，选用外置活塞式移液器可较好的改善移液过程和精确度。液体通过外置活塞吸入和分配，无气体活塞干扰，使得移液体积不会因样品的物理特性（密度、粘度和挥发性等）而受到影响，确保分液体积的准确性。 本期，小C将与大家一起分享，几种挑战性液体移液的案例分析，祝大家实验顺利！ 案例分析 示例：三氯甲烷 问题：移液体积小于预期值 分析：液体密度越高，单位体积的质量越大，从而对液体和活塞之间的气体施加越大的作用力，进而增大气体空间，导致吸取的液体量变小。 方案： 若使用气体活塞式移液器，建议重新校准。 推荐使用外置活塞式分液移液器。 示例：丙酮、乙腈 问题：吸头挂有水滴或滴液 分析：液体挥发，吸头内部形成气压，迫使部分液体流出，导致吸头挂液或滴液。预润吸头将有助于吸头中的空气达到或更接近于平衡点的蒸汽压力。 方案： 若使用气体活塞式移液器，建议至少预润吸头5次。 推荐使用外置活塞式分液移液器。 示例：甘油、Corning Matrigel® Matrix 问题：排液不准确；移液体积减少 分析：粘性液体易粘附在吸头表面，导致部分液体残留在吸头内。同时，活塞与液体间的气体空间越大（例如，使用1000μL吸头吸取100μL液体），误差越大。吸头量程越大，越不适用于移取粘度高的液体。 方案 若使用气体活塞式移液器，建议采用宽口的移液吸头，反向移液，同时缓慢移液。 建议使用外置活塞式分液移液器。 示例：37°C的试剂和缓冲液；4°C或更低温度的核酸样品 问题：移液体积小于或大于预期值 分析：在移液过程中，当液体温度高于吸头内部空气，气体膨胀并将液体推出，从而使移取的液体体积少于预期。反之，会导致移取的液体多于预期值。 方案： 若使用气体活塞式移液器，建议至少预润吸头5次。 建议使用移液量程在或接近目标移液体积的移液器，有助于提高精度。 文章来源于康宁生命科学 | |||
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