Corning® CellBIND® 表面 | |||
Corning® CellBIND® 表面
康宁生命科学很荣幸向大家介绍我们20年来最新的细胞培养表面处理技术—CellBIND®。康宁CellBIND表面可以增强不同条件下的细胞吸附能力,如在减少血清或无血清培养中得到更高的细胞产量。这是由康宁科学家发明的专利技术(U.S. Patent No. 6, 617,152)使用等离子微波技术处理培养表面,这种处理技术结合更多的氧到细胞培养表面来改善细胞吸附能力,表现为更好的亲水性和更强的表面稳定性。
更好的细胞吸附性,促进细胞贴壁生长并提高产量 更持续、均一的细胞吸附 使细胞快速适应减少血清或无血清条件 在使用滚瓶培养时,防止细胞过早脱落 消除乏味的、费时的、昂贵的与低稳定性的生物包被过程 不需要冷藏或者其他特殊处理,在室温储存下非常稳定 使用光学透明的聚苯乙烯制造 严格的质量控制测试保证产品质量的稳定性与重复性 经射线消毒的无菌与无热源认证 每个产品都有打印批号以保证质量与跟踪 打印康宁CellBIND表面标记以区分于普通处理的其它细胞培养产品 细胞接种和收获与传统方法一样,无需采取特别的措施,酶学与非酶学的消化方法都可以应用于从康宁CellBIND表面分离细胞,包括:Trypsin-EDTA、Accutase®,Versene® Dispase®与柠檬碱。有些分离方法如Dispase或Versene需要接种或保存细胞前事先离心去除。 下面的应用/技术资料的网址是www.corning.com/Lifesciences. 这些资料分别介绍了应用康宁CellBIND® 表面的优势,包括以下几部分内容: 康宁CellBIND表面:有效增强细胞吸附性的新型表面; 加强前列腺癌(LNCaP)细胞与康宁CellBIND表面的吸附性; 在无血清培养基中,康宁CellBIND表面对HEK 293细胞的促生长作用; 用CryoStorTM CS5冻存液保存的LNCaP细胞复苏后,用康宁CellBIND表面培养可提高LNCaP细胞的存活率; 结合康宁CellBIND表面和商业化的减少血清含量的培养基产品,既可以节约研究者的经费,还可以提高细胞生长与产量。 有效增强细胞吸附性的新型表面 结论 细胞贴壁时无需生物包被处理; 在减少血清含量的条件下提高细胞生长和蛋白产量; 增强难培养细胞系的贴壁性,提高细胞产量; 有利于原代细胞的复苏; 有利于严格操作和自动化; 无需特殊的贮存方法和操作步骤; 最大限度地节约FDA注册成本。
LNCap细胞复苏后在不同处理表面培养1天和7天的细胞产量。接种密度均1×10-6/瓶。左图为复苏后细胞培养24小时的细胞计数比较;图为培养7天的细胞计数比较。 加强前列腺癌 (LNCaP) 细胞与康宁CellBIND表面的吸附性 结论 与标准组织培养处理(TCT)表面相比,经过24小时培养的LNCaP细胞在康宁CellBIND表面贴壁的细胞平均多49%; 与标准组织培养处理(TCT)表面相比,7天培养的LNCaP细胞在康宁CellBIND表面的细胞存活率平均高64%; 与标准组织培养处理(TCT)表面相比,康宁CellBIND表面可增强LNCaP细胞的贴壁能力,在CellBIND表面培养的细胞形态更“舒展”、均一性更好。 LNCap细胞吸附性,细胞在解冻后放入康宁CellBIND表面(右)和组织培养处理表面(左)的T25培养瓶。接种24小时后的光学显微镜随机观察(100倍放大) 03 在无血清培养基中,康宁CellBIND 表面对HEK 293细胞的作用 结论 在无血清的条件下,在康宁CellBIND表面培养的HEK 293细胞比在标准TCT表面生长的细胞贴壁性更好; 经过96小时的培养,在康宁CellBIND表面贴壁的HEK细胞比TCT表面的细胞多69%; 在研究的过程中,康宁CellBIND表面的总细胞产量(贴壁和非贴壁的)更高。
HEK293细胞系在无血清条件下生长24小时,CellBIND表面生长(右)标准组织培养处理的表面(左)(100倍光学显微照片) 04 用CryoStorTM CS5冻存液保存的LNCaP细胞复苏后,用康宁CellBIND表面培养可提高LNCaP细胞的存活率 结论 CryoStorTM CS5冻存液和康宁CellBIND表面联合应用,可以显著增加解冻后LNCaP细胞的存活率; CryoStorTM CS5冻存液和康宁CellBIND表面联合应用,在细胞冻存的过程中无需加入蛋白或血清,从而降低成本和用动物来源的血清或蛋白的风险。 左图.冻存的LNCap细胞复苏后在不同处理表面的T25培养瓶中培养24小时的存活率和贴壁情况的比较。存活率定义为标准培养条件下直接进行细胞计数的结果(数据是三次独立实验的平均数±标准差)。 右图.冻存的LNCap细胞复苏后在不同处理表面的96孔板中培养24小时的存活率和贴壁情况的比较。存活率定义为标准培养条件下Alamar Blue的结果 (数据是三次独立实验的平均数±标准差)。 结合康宁CellBIND表面和商业化的减少血清含量的培养基产品,既可以节约研究者的经费,还可以提高细胞生长与产量。 技术要点 如果您的培养基中含有高浓度的血清(≥10%),您完全可以采取一些简单的措施来减少最低50%的血清用量,从而减少总的实验成本。为了使细胞更好地贴壁和生长,您可以: 在减少血清浓度的培养条件下,试一下用康宁CellBIND表面来增加细胞的吸附性。 逐步降低血清的浓度使细胞更好地适应新环境,如从10%降至7.5%至5%。 开始培养时将培养基预热来加速细胞贴壁。 初次培养贴壁细胞时,为了降低培养液pH的增加,最好将培养器皿预平衡或预充气,尤其是比较大的培养板、滚瓶和康宁CellSTACK细胞工厂。细胞初次贴壁越难,之后的贴壁和生长就越不均一。 接种细胞密度至少为10,000-20,000个/cm2。 第一次降低血清含量时,如果细胞难贴壁或生长缓慢,可以将接种细胞密度增加至正常水平的两倍使其更好地适应新环境。 收集细胞时动作要轻柔、迅速,避免损伤细胞膜;尽量减少细胞接触蛋白酶(如胰蛋白酶)的时间。 100g离心5分钟或尽量缩短离心时间使细胞沉淀比较松散,容易重悬起来。 确保消化液失活或离心去除,血清蛋白可以使胰蛋白酶失活,但在血清浓度低时可能不会完全失活。 要耐心!在降低培养基血清浓度时可能需要几次实验逐步降低,以使细胞完全适应新环境。 订货详情请咨询:0755-83773516/26/36
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