大规模生产的悬浮细胞培养越来越多地融入在药物开发和生产领域，用于适合规模化悬浮培养的细胞培养容器也在不断进化。在过去，无论是一次性塑料摇瓶还是用于悬浮生长的玻璃转瓶都可以应用于大规模细胞悬浮培养。然而，振荡摇瓶的搅拌机制不同于转瓶，可能会对放大效率产生负面影响，而玻璃转瓶需要耗时组装、清洁和灭菌。

本期，小C将为大家介绍康宁塑料转瓶的特点：即无需组装且属于单次使用产品。在该篇比较性研究中，采用一次性转瓶培养哺乳动物细胞和昆虫细胞，并对培养参数进行优化。我们评估了多项代谢参数，以及不同条件下细胞的产量和活率，比较了细胞在塑料转瓶和玻璃转瓶中悬浮培养的表现。

康宁一次性塑料转瓶的特点：

•Gamma辐照灭菌

•双层独立无菌包装，适用于GMP环境

•无需清洗或组装

•提供单独转移盖和预组装转移盖的转瓶，适用于各种封闭系统

康宁转瓶悬浮培养CHO-S和SF-9细胞

无血清驯化后的CHO-S细胞培养在化学成分限定的CHO细胞培养基, 添加1% HT添加剂以及8mM L-谷氨酰胺。Sf9细胞培养用Sf-900 II SFM培养基培养， 分别培养在康宁1L一次性塑料转瓶（Corning,货号# 3561）和 1L玻璃转瓶（Corning, 货号# 4500-1L）。

CHO-S细胞接种于转瓶，接种细胞密度为2.5X105/mL，培养于37°C，5% CO2条件中。Sf9细胞接种于转瓶，接种细胞密度为1X106/mL，培养于28°C未加湿的环境中。转瓶都置于低速磁力搅拌器上 (Corning, SS4L, part# 440814), 设置转速60rpm。每天从各转瓶中取样计数并检测代谢物状况，直至细胞培养达到稳定期(96小时) 。细胞计数用Beckman Coulter Z2计数仪。代谢物分析用的是Nova Bioprofile® 400。

实验结果

图1左：每天监测CHO-S细胞的平均细胞活率（n=24）；图1右：每天监测Sf9细胞的平均细胞活率（n=24）

图2：A：对比96小时内CHO-S细胞在1L塑料转瓶和玻璃转瓶的生长曲线，60rpm，三组实验（n=6）；B：96小时内监测培养基内空气饱和度；C：96小时内监测培养基葡萄糖消耗。

图3：A：对比96小时内Sf9细胞在1L塑料转瓶和玻璃转瓶的生长曲线，60rpm，两组实验（塑料转瓶n=4，b玻璃转瓶n=3）；B：96小时内监测培养基内空气饱和度；C：96小时内监测培养基葡萄糖消耗。

结论

•悬浮细胞的生长速率和细胞活率在大体积一次性塑料转瓶中和传统玻璃转瓶表现相当

•一次性塑料转瓶中的通气率与玻璃转瓶通气效率相当

•悬浮细胞在一次性塑料转瓶和玻璃转瓶中的代谢表现相同

•多种细胞类型可以培养于一次性塑料转瓶

康宁塑料转瓶Spinner Flask 订购信息：

文章来源于康宁生命科学