NK细胞

自然杀伤（NK）细胞在识别和杀死肿瘤和病毒感染的先天和后天免疫反应中扮演着关键的角色。因此，已有许多研究尝试研发在体外激活和扩增NK细胞的方法。但是NK 细胞在常用的生物样本如外周血，脐带血中含量很低，扩增难度大。将NK用于生物治疗，除了要获得足够数量的NK细胞，还要保证其具有和体内一样的细胞毒性。这对很多实验人员来说，是一个极其有挑战的工作。

有没有可以帮助实验人员更快速高效地获得有生物活性的NK细胞呢？本期小C将为您隆重介绍康宁第二代NK细胞无血清培养试剂盒！

这是一款无外源成分（xeno-free）的培养体系，含有四个组分：

1x1 mL 包被培养基

1x50 mL 激活培养基

1x1,000 mL 扩增培养基

1x 640cm²透气性细胞培养袋

包被培养基和激活培养基专用于NK细胞的初期激活培养，扩增培养基和细胞培养袋则用于NK细胞后期扩增培养。NK激活培养基和扩增培养基均采用优质的试剂和符合目前的良好生产规范（cGMP）要求的原料制造。

第二代NK培养试剂盒的实验结果

NK细胞形态

树突状细胞附着在培养瓶表面上，而NK细胞经培养会形成较小的细胞团块。该细胞团块的体积会随着细胞密度的上升而增加。图1显示活化后培养10天的NK细胞在不同培养基中的形态。NK培养试剂盒和NK无血清培养试剂盒II的培养液中观察到的细胞团块远多于竞争产品I和竞争产品Y的培养基中观察到的细胞团块。

NK细胞的增殖和扩增

对于NK细胞的增殖，如图2和图3所示，NK细胞在分别利用NK无血清培养试剂盒II和NK培养试剂盒培养14天后扩增了230倍和200倍，总细胞数量分别为7 x 109个细胞和6 x 109个细胞，比竞争产品I的培养试剂盒（只达到70倍的扩增）多了3倍。利用竞争产品Y的培养试剂盒培养的NK细胞呈比较差的扩增表现，这也与其细胞形态学观察结果一致。

图2：NK细胞培养14天的增殖曲线

图3：NK细胞在培养14天后展现出的增值能力

NK细胞的表型

NK细胞的特异表面标志物为CD3-/CD56+。流式细胞的分析结果显示使用NK无血清培养试剂盒II可获得86.7％^*的NK阳性细胞（健康人外周血样本），而使用竞争产品I和竞争产品Y的培养试剂盒则获得相对较少的NK阳性细胞（分别为66.1％和78.8％），数据如图4所示。（*：本数据仅供参考，不同样本来源结果会有差异）

图4：用流式细胞术测定表面标志物（CD3-/CD56+）于NK细胞上的表达。

CCK-8细胞毒性

图5：CCK-8法评估NK细胞对K562细胞的细胞毒性。该细胞毒性测定是在效应细胞（NK细胞）与靶细胞（K562细胞）的比例为5和10的情况下进行。

结论

• 使用康宁NK无血清培养试剂盒II可快速激活扩增NK细胞，可获取数量大（~70亿细胞，即230倍的增殖），具有高细胞毒性效力（在E/T比例为5：1的状况下达到100％的细胞毒性效力）的NK细胞。

• 与竞争产品I和竞争产品Y的培养试剂盒相比，培养于康宁NK无血清培养试剂盒II的NK细胞在生长、NK阳性细胞比率以及细胞毒性效力方面均表现出了更好的性能。

   

订购信息

文章来源于康宁生命科学