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如何选择Transwell® 通透性支持物的材质和孔径?

 细胞和组织培养技术在基础和应用生命科学领域的重要性日益提高。为尽可能的模拟体内环境以培养某些特殊的细胞系,使用带有多微孔膜的通透性支持物培养这些细胞成为基本的方法。通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养,因为这些支持物允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子,从而以更为自然的方式进行代谢。

 对于表皮细胞和其他种类的细胞,利用通透性支持物在体外培养使得细胞可以在更为自然的极性条件下生长和研究。同时提高了细胞的分化水平,使得体外生长的细胞在形态和功能上更为接近体内的细胞。还可以进行运输,吸收和分泌等细胞功能的研究,因为在通透性支持物上生长的细胞可以很方便且无干扰的接近其基底面和顶面的细胞膜结构。使用通透性支持物进行细胞培养对于实验细胞学研究是一个无可比拟的工具。

选择合适的Transwell® 膜

康宁的Transwell通透性支持物可以提供三种膜材料:聚碳酯(PC),聚酯(PET)和胶原包被的聚四氟乙烯(PTFE),实验中可以根据需要选择合适的膜材料。它们的详细信息如下:

选择合适的孔径

在实验中使用Transwell®通透性支持物时选择合适的孔径也是十分重要的。表2总结了通透性支持物的常规应用和推荐使用的孔径。最小孔径的Tanswell膜(0.1um)主要应用于药物转导研究。细胞侵袭,趋化性和运动性研究通常采用3.0um或以上的孔径的Tranwell膜。细胞从膜的孔中迁徙通过的能力与选用的细胞系及培养条件有关,同时也与孔径相关。小于3.0um孔径条件下,细胞不会迁徙通过。对于一些要求严格的实验,康宁建议在实验中选用一系列孔径作为对照来确定哪种尺寸最适合于你的细胞培养和特殊应用。还有一 个方法就是参照已经发表的文献的推荐。

 

使用提示

1. 通透性支持物上的细胞形态和密度受滤膜孔径的影响。

2. 一些孔径大的膜可以容许细胞穿过。

3. 在通透性支持物上生长的细胞的贴附对于起始接种密度很敏感。初次使用应接种不同密度保证最佳生长。

4. 在培养之前将通透性支持物在培养基中孵育可以改善细胞得贴附和分布。

5. 与塑料培养表面一样,细胞在通透性支持物上仍然需要细胞外支架的包被。

6. 透明的Transwell是带有透明的,经组织培养处理的聚酯膜,细胞在相差显微镜下很容易被观察。

7. Transwell-COL带有PTFE膜,经过等摩尔数的I型和III型牛胎盘胶原处理。从而形成了覆盖在滤膜纤维上的具有生物稳定性的胶原骨架。这些Transwell嵌套适用于需生物包被的细胞培养。

 

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